切换至 "中华医学电子期刊资源库"

中华普通外科学文献(电子版) ›› 2008, Vol. 02 ›› Issue (04) : 282 -286. doi: 10.3877/cma.j.issn.1674-0793.2008.04.008

论著

手霉素通过反应性氧基诱导甲状腺未分化癌KAT-4细胞凋亡
李劲高1, 佘妙容2,(), 黄湖辉1, 宛霞1   
  1. 1.510120 广州,中山大学附属第二医院肾内科
    2.510080 广州,广东省人民医院血液科
  • 收稿日期:2008-06-28 出版日期:2008-08-01
  • 通信作者: 佘妙容
  • 基金资助:
    广东省自然科学基金项目(7001196)广东省医学科研基金项目(A2006020)广东省中医药局基金(2007180)

Manumycin-induced apoptosis via reactive oxygen species in KAT-4 anaplastic thyroid cancer cells

Jin-gao LI1, Miaorong SHE,1(), Hu-hui HUANG1, Xia WAN1   

  1. 1.Department of Nephrology, the Second Affiliated Hospital, SunYat-Sen University, Guangzhou 510120, China
  • Received:2008-06-28 Published:2008-08-01
  • Corresponding author: Miaorong SHE
引用本文:

李劲高, 佘妙容, 黄湖辉, 宛霞. 手霉素通过反应性氧基诱导甲状腺未分化癌KAT-4细胞凋亡[J/OL]. 中华普通外科学文献(电子版), 2008, 02(04): 282-286.

Jin-gao LI, Miaorong SHE, Hu-hui HUANG, Xia WAN. Manumycin-induced apoptosis via reactive oxygen species in KAT-4 anaplastic thyroid cancer cells[J/OL]. Chinese Archives of General Surgery(Electronic Edition), 2008, 02(04): 282-286.

目的

研究手霉素对甲状腺未分化癌KAT-4细胞的作用,探讨其作用机制。

方法

使用人的甲状腺未分化癌KAT-4细胞,MTT细胞毒性测定评价手霉素对KAT-4细胞的作用,使用annexin v 和一氧化氮(nitric oxide,NO)染料标记细胞,应用流式细胞仪术检测细胞内NO生成和细胞凋亡;细胞内超氧阴离子通过二氢乙啶(dihydroethidium,DHE)测定;采用荧光法测定谷胱甘肽(glutathione,GSH)。

结果

手霉素降低KAT-4细胞活性,且呈剂量依赖性。手霉素诱导KAT-4细胞凋亡和反应性氧基(reactive oxygen species,ROS)产生包括NO和超氧阴离子增加和GSH降低。手霉素诱导细胞凋亡与ROS的增加有关,N-乙酰基-L-半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)可抑制ROS产生,保护KAT-4细胞逃避手霉素的细胞毒作用和避免手霉素诱导的凋亡。

结论

细胞内ROS的产生对手霉素的细胞毒作用起非常重要的作用。手霉素通过增加ROS产生诱导甲状腺癌细胞凋亡。

Objective

To investigate the effects of manumycin on KAT-4 anaplastic thyroid cancer cell line, and to explore the mechanism.

Methods

Human anaplastic thyroid cancer cells KAT-4 were used.The cytotoxicity was analyzed by MTT assay.Apoptosis and cellular nitric oxide were detected by flow cytometry using annexin v and NO sensor dye.Superoxide anion was measured with a fluorescent plate reader by DHE.GSH was assayed by fluorescent monochlorobimane.

Results

Manumycin resulted in viability decrease in a dose-dependent manner.Manumycin induced apoptosis and ROS generation including nitric oxide and superoxide anions.Manumycin reduced intracellular glutathione.Manumycin-induced apoptosis correlated with increase in ROS.Quenching of ROS with N-acetyl-L-cysteine protected leukemia cells from the cytotoxicity of manumycin and prevented apoptosis induction by manumycin.

Conclusion

Cellular ROS generation plays an important role in the cytotoxic effect of manumycin. Manumycin induces apoptosis through ROS generation in KAT-4 cells.

图1 手霉素细胞毒作用的剂量-反应曲线。0~54 μmol/L手霉素处理细胞48 h 后,MTT 检测细胞活性。以手霉素浓度为x 轴制作相对于对照组的平均活性图。误差柱代表三次独立实验的95%可信区间。
图2 手霉素诱导KAT-4 细胞凋亡。用流式细胞仪和annexin v 评价手霉素诱导细胞凋亡的作用。DMSO 对照或手霉素54 μmol/L 处理细胞6 h。图2 显示annexin V-PE 结合的荧光图。
图3 手霉素诱导KAT-4 细胞产生ROS。54 μmol/L手霉素处理细胞。(A) 手霉素增加NO 阳性细胞数。(B)手霉素增加超氧阴离子产生。随着处理时间延长,超氧阴离子逐渐增加。误差柱代表三次独立实验的95%可信区间。(C)手霉素降低细胞内GSH。误差柱代表三次独立实验的95%可信区间。
图4 NAC 阻断手霉素诱导KAT-4 细胞产生ROS (A)NAC 阻断手霉素诱导KAT-4 细胞凋亡和NO 产生。(B) NAC 阻断手霉素诱导KAT-4 细胞产生超氧阴离子。(C)NAC 阻断手霉素降低KAT-4 细胞GSH。
图5 NAC 保护KAT-4 细胞避免手霉素造成的细胞活性下降细胞用54 μmol/L 手霉素,NAC 5 mmol/L 或两药联合处理48 h。误差柱代表三次独立实验的标准差。
1
Yeung SC,She M,Yang H,et al.Combination chemotherapy including combretastatin A4 phosphate and paclitaxel is effective against anaplastic thyroid cancer in a nude mouse xenograft model.J Clin Endocrinol Metab,2007,92(8):2902-2909.
2
Pasieka JL.Anaplastic thyroid cancer.Curr Opin Oncol,2003,15(1):78-83.
3
O'Neill JP,O'Neill B,Condron C,et al.Anaplastic (undifferentiated)thyroid cancer:improved insight and therapeutic strategy into a highly aggressive disease.J Laryngol Otol,2005,119(8):585-591.
4
She M, Pan I, Sun L, et al.Enhancement of manumycin A-induced apoptosis by meth oxyamine in myeloid leukemia cells.Leukemia, 2005,19(4):595-602.
5
She M, Jim Yeung SC.Combining a matrix metalloproteinase inhibitor, a farnesyltransferase inhibitor, and a taxane improves survival in an anaplastic thyroid cancer model.Cancer Lett,2006,238(2):197-201.
6
Ito T,Kawata S,Tamura S,et al.Suppression of human pancreatic cancer growth in BALB/c nude mice by manumycin,a farnesyl:protein transferase inhibitor.Jpn J Cancer Res,1996,87(2):113-116.
7
Frassanito MA,Mastromauro L,Cusmai A,et al.Blockade of the Ras pathway by manumycin,a farnesyltransferase inhibitor,overcomes the resistance of myeloma plasma cells to Fas-induced apoptosis.Clin Exp Med,2005,4(4):174-182.
8
Pan J,Huang H,Sun L,et al.Bcl-2-associated X protein is the main mediator of manumycin a-induced apoptosis in anaplastic thyroid cancer cells.J Clin Endocrinol Metab,2005,90(6):3583-3591.
9
Selleri C,Maciejewski JP,Montuori N,et al.Involvement of nitric oxide in farnesyltransferase inhibitor-mediated apoptosis in chronic myeloid leukemia cells.Blood,2003,102(4):1490-1498.
10
Pervin S,Singh R,Gau CL,et al.Potentiation of nitric oxide-induced apoptosis of MDA-MB-468 cells by farnesyltransferase inhibitor:implications in breast cancer.Cancer Res,2001,61(12):4701-4706.
11
Pan J,Yeung SC.Recent advances in understanding the antineoplastic mechanisms of farnesyltransferase inhibitors.Cancer Res,2005,65(20):9109-9112.
12
Pan J,She M,Xu ZX,et al.Farnesyltransferase inhibitors induce DNA damage via reactive oxygen species in human cancer cells.Cancer Res,2005,65(9):3671-3681.
[1] 张刚, 秦勇, 黄超, 薛震, 吕松岑. 基于骨关节炎软骨细胞表型转化的新兴治疗靶点[J/OL]. 中华关节外科杂志(电子版), 2024, 18(03): 352-362.
[2] 钟雅雯, 王煜, 王海臻, 黄莉萍. 肌苷通过抑制线粒体通透性转换孔开放缓解缺氧/复氧诱导的人绒毛膜滋养层细胞凋亡[J/OL]. 中华妇幼临床医学杂志(电子版), 2024, 20(05): 525-533.
[3] 孙鸿坤, 艾虹, 陈正. 内质网应激介导的牙周炎骨改建失衡的研究进展[J/OL]. 中华口腔医学研究杂志(电子版), 2024, 18(04): 211-218.
[4] 廖泽楷, 梁爱琳, 龚启梅. 根尖周病中程序性细胞死亡的研究进展[J/OL]. 中华口腔医学研究杂志(电子版), 2024, 18(03): 150-155.
[5] 唐亦骁, 陈峻, 连正星, 胡海涛, 鲁迪, 徐骁, 卫强. 白果内酯对小鼠肝缺血再灌注损伤保护作用研究[J/OL]. 中华移植杂志(电子版), 2024, 18(05): 278-282.
[6] 郑俊, 吴杰英, 谭海波, 郑安全, 李腾成. EGFR-MEK-TZ三联合分子的构建及其对去势抵抗性前列腺癌细胞增殖与凋亡的影响[J/OL]. 中华腔镜泌尿外科杂志(电子版), 2024, 18(05): 503-508.
[7] 胡思平, 熊性宇, 徐航, 杨璐. 衰老相关分泌表型因子在前列腺癌发生发展中的作用机制[J/OL]. 中华腔镜泌尿外科杂志(电子版), 2024, 18(05): 425-434.
[8] 李勇, 彭天明, 王倩倩, 陈育纯, 蒲小勇, 刘久敏. 基于失巢凋亡相关基因的膀胱癌预后模型构建及分析[J/OL]. 中华腔镜泌尿外科杂志(电子版), 2024, 18(04): 331-339.
[9] 黄程鑫, 陈莉, 刘伊楚, 王水良, 赖晓凤. OPA1 在乳腺癌组织的表达特征及在ER阳性乳腺癌细胞中的生物学功能研究[J/OL]. 中华细胞与干细胞杂志(电子版), 2024, 14(05): 275-284.
[10] 季加翠, 孙春斌, 罗恩丽. 姜黄素通过调节NF-κB/NLRP3通路减轻LPS诱导小胶质细胞神经炎症损伤[J/OL]. 中华细胞与干细胞杂志(电子版), 2024, 14(04): 193-203.
[11] 刘杜先, 张杰东, 付鲁渝, 熊志强, 龚程, 张小雅, 高明悦, 孟俊宏, 刘兰侠. 沉默circXPO1抑制肝癌细胞恶性生物学行为[J/OL]. 中华细胞与干细胞杂志(电子版), 2024, 14(03): 159-166.
[12] 杜霞, 马梦青, 曹长春. 造影剂诱导的急性肾损伤的发病机制及干预靶点研究进展[J/OL]. 中华肾病研究电子杂志, 2024, 13(05): 279-282.
[13] 王国强, 张纲, 唐建坡, 张玉国, 杨永江. LINC00839 调节miR-17-5p/WEE1 轴对结直肠癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响[J/OL]. 中华消化病与影像杂志(电子版), 2024, 14(06): 491-499.
[14] 靳英, 付小霞, 陈美茹, 袁璐, 郝力瑶. CD147调控MAPK信号通路对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响及机制研究[J/OL]. 中华临床医师杂志(电子版), 2024, 18(05): 474-480.
[15] 刘霖, 张文欢, 宋雅茹, 姜云璐. Apelin-13 在阿尔茨海默病中的神经保护作用机制研究进展[J/OL]. 中华诊断学电子杂志, 2024, 12(04): 276-280.
阅读次数
全文


摘要