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中华普通外科学文献(电子版)

中华普通外科学文献(电子版) ›› 2008, Vol. 02 ›› Issue (06) : 19 -21. doi: 10.3877/cma.j.issn.1674-0793.2008.06.009

论著

门静脉高压症脾功能亢进脾巨噬细胞Toll样受体2、4mRNA表达变化的研究
苏清华1, 张澍1, 李宗芳1,†(), 黄辰2, 任松1, 张伟1, 蒋安1, 杨安宁1   
  1. 1.710004 西安，西安交通大学医学院第二附属医院外科
    2.710061 西安，西安交通大学医学院环境与疾病相关基因教育部重点实验室
  • 收稿日期:2008-10-22 出版日期:2008-12-01
  • 通信作者: 李宗芳
  • 基金资助:
    国家自然科学基金资助项目(30471672)教育部新世纪优秀人才支持计划(2004NCET-04-0932)教育部优秀青年教师资助计划项目(2003)

Expression of Toll-like receptor 2,4 mRNA of splenic macrophage in hypersplenism due to portal hypertension

Qing-hua SU1, Shu ZHANG1, Zong-fang LI1,†(), Chen HUANG1, Song REN1, Wei ZHANG1, An JIANG1, An-ning YANG1   

  1. 1.Department of surgery, the Second Affiliated Hospital, School of Medicine, Xi'an Jiaotong University, Xi'an 710004, China
  • Received:2008-10-22 Published:2008-12-01
  • Corresponding author: Zong-fang LI
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引用本文：

苏清华, 张澍, 李宗芳, 黄辰, 任松, 张伟, 蒋安, 杨安宁. 门静脉高压症脾功能亢进脾巨噬细胞Toll样受体2、4mRNA表达变化的研究[J/OL]. 中华普通外科学文献(电子版), 2008, 02(06): 19-21.

Qing-hua SU, Shu ZHANG, Zong-fang LI, Chen HUANG, Song REN, Wei ZHANG, An JIANG, An-ning YANG. Expression of Toll-like receptor 2,4 mRNA of splenic macrophage in hypersplenism due to portal hypertension[J/OL]. Chinese Archives of General Surgery(Electronic Edition), 2008, 02(06): 19-21.

目的

检测门静脉高压症（PH）脾亢脾和正常脾巨噬细胞（Mφ）中Toll样受体2、4（TLR2、4）mRNA的表达差异，为进一步深入探讨Toll样受体在PH脾亢发生中的作用奠定基础。

方法

选取门静脉高压症脾亢患者（均为慢性乙型肝炎患者）的手术切除脾脏（12例）为实验组，外伤性脾破裂患者的手术切除脾脏（4例）为正常对照组。贴壁培养法分离纯化脾脏组织Mφ，荧光定量PCR法对Mφ表面Toll样受体2、4 mRNA的表达进行检测，并将两组结果进行统计学分析比较。

结果

与正常脾脏相比，PH脾亢脾Mφ TLR2、4 mRNA的表达水平明显增强（TLR2：2.29±0.55 vs 1.06±0.53，P <0.05；TLR4：2.32±0.41 vs 1.01±0.14，P<0.01）。

结论

PH脾亢脾Mφ TLR2、4的mRNA表达水平明显升高，与蛋白水平免疫组化的结果一致，进一步支持了“内毒素血症→脾脏MφToll样受体活化→Mφ吞噬破坏血细胞增多”是PH脾亢发生可能机制的观点。

关键词: 门静脉高压症, 脾功能亢进, 巨噬细胞, Toll样受体, 聚合酶链反应

Objective

To investigate the different expression of Toll-like receptor 2,4(TLR2,4)mRNA on splenic macrophage (Mφ)in hypersplenism due to portal hypertension (PH), providing the evidence for discussing the effects of TLR in pathogenesis of hypersplenism.

Methods

12 patients with hypersplenism due to PH and 4 patients with traumatic rupture of spleen were regarded as hypersplenia and control group respectively.The expressions of TLR2,4 were detected by real time-PCR.The results of two groups were compared.

Results

As compared to control group,the expression of TLR2,4 mRNA were increased significantly(TLR2:2.29±0.55 vs 1.06±0.53，P<0.05；TLR4:2.32±0.41 vs 1.01±0.14，P<0.01).

Conclusion

The expression of TLR2,4 mRNA increased significantly,consistent with the result of protein expression.It has been further supported that＂endotoxemia→activation of TLRs→increase of phagocytosis of splenic Mφ→hypersplenism＂, this may be one of the mechanism of hypersplenism due to PH.

Key words: Hypertension, portal, Hypers plenism, Macrophage, Tolllike receptor, real-timePCR
表1 Real time PCR 引物序列
名称 登录号 上游引物 下游引物
TLR2 NM_003264 5’CGGAGGCAGCGAGAAAGC3’ 5’TGAAAGCAGTGAAAGAGCAATGG3’
TLR4 NM_138554 5’CGAGGAAGAGAAGACACCAG3’ 5’TCACGCAGGAGAGGAAGG3’
GAPDH NM_002046 5’TCTCTGCTCCTCCTGTTC3’ 5’CTCCGACCTTCACCTTCC3’
表2 脾Mφ TLR2、4 mRNA 的相对表达水平
组别 例数 TLR2 TLR4
脾亢组 12 2.29±0.55 2.32±0.41
对照组 4 1.06±0.53 1.01±0.14
P值 <0.05 <0.01
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