同种异体肝细胞与脂肪间质干细胞移植治疗肝硬化的实验对照研究

doi:10.3877/cma.j.issn.1674-0793.2011.01.004

目的

比较同种异体肝细胞与脂肪间质干细胞（ADMSCs）经门静脉途径移植对肝硬化的疗效差异。

方法

四氯化碳法诱导SD大鼠肝硬化模型，30只成模大鼠随机分入ADMSCs移植组和成熟肝细胞移植组，各15只。从肠系膜上静脉分别移植ADMSCs及成熟肝细胞悬液2 ml/只（细胞浓度为2×10⁶/ml），细胞移植前后（0、1、2、4周）检测各组大鼠肝功能，移植后4周切取肝脏组织样本，HE染色后光学显微镜下观察肝细胞变性坏死及肝硬化程度的变化。

结果

移植后7、14、28 d两组间AST、ALT值差异有统计学意义（P<0.05），而两组间ALB、TBIL值无显著性差异；ADMSCs移植组较肝细胞移植组在肝纤维化、肝细胞变性坏死及脂肪变等方面均有不同程度改善，其组织病理学评分组间有显著性差异（P<0.05）。

结论

脂肪间质干细胞移植较成熟肝细胞移植能更有效地改善肝硬化大鼠模型肝脏的功能，抑制肝组织的变性坏死和纤维化形成。

关键词: 脂肪间质干细胞, 肝细胞, 移植, 肝硬化

Objective

To evaluate the therapeutic effects of adipose mesenchymal stem cells (ADMSCs) and hepatocyte transplanted for the hepatic cirrhosis model of rats induced by CCL₄.

Methods

Thirty SD rats of hepatic cirrhosis model were randomly divided averagely into two groups and transplanted through Superior Mesenteric vein. Liver functions of rat was examined before and after cell transplantation. HE stain was performed to liver specimen slices. The degeneration and necrosis of hepatic cells and the degree of liver fibrosis were observed under microscope, and further pathological evaluation was made according to observation result.

Results

The liver functions of ADMSCs group was improved significantly in comparison with that of hepatocyte(P<0.05). The transplantation of ADMSCs could inhibit the degeneration and necrosis of hepatic tissue and improve liver fibrosis of the rats. The difference of pathological evaluation between two groups had statistical sense(P<0.05).

Conclusions

The transplantation of ADMSCs through Superior Mesenteric vein has therapeutic effect for the hepatic cirrhosis model of rats. It can improve liver functions and inhibit liver fibrosis.

Key words: Adipose tissue-derived mesenchymal stem cells, Hepatocyte, Transplantation, Hepatic cirrhosis

图1 培养的脂肪干细胞光学显微镜下观（×100），图中显示细胞梭形贴壁，生长旺盛

图2 经肠系膜上静脉移植细胞，图中显示为肠系膜上动脉

图3 移植前肝硬化大鼠模型肝脏（大体），表面可见大小不等的硬化结节分布

图4 移植前肝硬化大鼠模型肝脏（HE染色　×200），重度纤维化，纤维间隔粗厚，假小叶明显

图5 脂肪间质干细胞移植后（大体），肝脏表面纹理变细，局部可见细小颗粒样突起，结节形成较移植前明显减少

图6 脂肪间质干细胞移植后（HE染色　×100），细胞变性及脂肪变较前明显减轻

表1 细胞移植前后两组大鼠肝功能指标检测结果（±s）

项目	组别	动物（只）	0d	7d	15 d	30 d
AST（U/L）	1	15	371.5±25.7	422.6±18.4	298.2±17.6	183.2±26.4
AST（U/L）	2	15	388.2±29.7	440.3±17.2	302.2±21.2	312.2±17.9
ALT（U/L）	1	13	617.6±54.6	756.7±35.3	456.7±35.3	301.3±11.8
ALT（U/L）	2	12	603.4±58.6	809.4±18.9	771.4±18.9	503.4±18.9
ALB（g/L）	1	13	20.4±1.8	22.2±1.7	17.2±3.1	21.9±2.1
ALB（g/L）	2	12	19.6±2.0	17.3±2.0	26.3±2.0	20.3±2.0
TBIL（μmol/L）	1	13	15.1±1.9	17.8±3.1	15.3±3.1	16.3±2.2
TBIL（μmol/L）	2	12	14.3±2.2	18.1±2.5	17.1±2.5	17.5±1.5

表1 细胞移植前后两组大鼠肝功能指标检测结果（±s）

项目	组别	动物（只）	0d	7d	15 d	30 d
AST（U/L）	1	15	371.5±25.7	422.6±18.4	298.2±17.6	183.2±26.4
AST（U/L）	2	15	388.2±29.7	440.3±17.2	302.2±21.2	312.2±17.9
ALT（U/L）	1	13	617.6±54.6	756.7±35.3	456.7±35.3	301.3±11.8
ALT（U/L）	2	12	603.4±58.6	809.4±18.9	771.4±18.9	503.4±18.9
ALB（g/L）	1	13	20.4±1.8	22.2±1.7	17.2±3.1	21.9±2.1
ALB（g/L）	2	12	19.6±2.0	17.3±2.0	26.3±2.0	20.3±2.0
TBIL（μmol/L）	1	13	15.1±1.9	17.8±3.1	15.3±3.1	16.3±2.2
TBIL（μmol/L）	2	12	14.3±2.2	18.1±2.5	17.1±2.5	17.5±1.5

图7 成熟肝细胞移植后（大体），肝脏表面可见大小不等的硬化结节分布，与移植前变化不明显

图8 成熟肝细胞移植后（HE染色　×100），肝细胞不同程度变性、坏死、胞质疏松化，透明脂肪滴分布不明显

表2 细胞移植后（4周）肝脏标本病理评分（±s）

组别	动物数（只）	肝纤维化	肝细胞变性坏死	脂肪变性
脂肪间质干细胞组	13	3.50±0.31	2.25±0.23	3.52±0.38
成熟肝细胞组	12	2.17±0.45	1.35±0.29	1.48±0.21

表2 细胞移植后（4周）肝脏标本病理评分（±s）

组别	动物数（只）	肝纤维化	肝细胞变性坏死	脂肪变性
脂肪间质干细胞组	13	3.50±0.31	2.25±0.23	3.52±0.38
成熟肝细胞组	12	2.17±0.45	1.35±0.29	1.48±0.21

1	Wang X, Mani P, Sarkar DP, et al. Ex vivo gene transfer into hepatocytes. Methods Mol Biol, 2009, 481: 117-140.
2	Okura H, Komoda H, Saga A, et al. Properties of hepatocyte-like cell clusters from human adipose tissue-derived mesenchymal stem cells. Tissue Eng Part C Methods, 2010, 16(4): 761-770.
3	Mao S J, Bi Y Q, Jin H, et al. Preparation, characterization and uptake by primary cultured rat hepatocytes of liposomes surface-modified with glycyrrhetinic acid. Pharmazie, 2007, 62(8): 614-619.
4	D'Albuquerque LA, Gonzalez AM, Wahle RC, et al. Liver transplantation for subacute hepatocellular failure due to massive steatohepatitis after bariatric surgery. Liver Transpl, 2008, 14(6): 881-885.
5	de Mattos CA, Alves AL, Golim MA, et al. Isolation and immunophenotypic characterization of mesenchymal stem cells derived from equine species adipose tissue. Vet Immunol Immunopathol, 2009, 132(2-4): 303-306.
6	Ivanova-Todorova E, Bochev I, Mourdjeva M, et al. Adipose tissue-derived mesenchymal stem cells are more potent suppressors of dendritic cells differentiation compared to bone marrow-derived mesenchymal stem cells. Immunol Lett, 2009, 126(1-2): 37-42.
7	Knippenberg M, Helder MN, de Blieck-Hogervorst JM, et al. Prostagl andins differentially affect osteogenic differentiation of human adipose tissue-derived mesenchymal stem cells. Tissue Eng, 2007, 13(10): 2495-2503.
8	Seo M J, Suh S Y, Bae Y C, et al. Differentiation of human adipose stromal cells into hepatic lineage in vitro and in vivo. Biochem Biophys Res Commun, 2005, 328(1): 258-264.
9	Bucher NL. Liver regeneration: an overview. J Gastroenterol Hepatol, 1991, 6(6): 615-624.
10	Ambrosino G, Varotto S, Strom SC, et al. Isolated hepatocyte transplantation for Crigler-Najjar syndrome type 1. Cell Transplant, 2005, 14(2-3): 151-157.
11	Hughes RD, Mitry RR, Dhawan A. Hepatocyte transplantation for metabolic liver disease: UK experience. J R Soc Med, 2005, 98(8): 341-345.
12	Ishii K, Yoshida Y, Akechi Y, et al. Hepatic differentiation of human bone marrow-derived mesenchymal stem cells by tetracycline-regulated hepatocyte nuclear factor 3beta. Hepatology, 2008, 48(2): 597-606.
13	Deng X, Chen YX, Zhang X, et al. Hepatic stellate cells modulate the differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells into hepatocyte-like cells. J Cell Physiol, 2008, 217(1): 138-144.

[1]	史学兵, 谢迎东, 谢霓, 徐超丽, 杨斌, 孙帼. 声辐射力弹性成像对不可切除肝细胞癌门静脉癌栓患者放射治疗效果的评价[J/OL]. 中华医学超声杂志（电子版）, 2024, 21(08): 778-784.
[2]	李华志, 曹广, 刘殿刚, 张雅静. 不同入路下行肝切除术治疗原发性肝细胞癌的临床对比[J/OL]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2025, 19(01): 52-55.
[3]	常小伟, 蔡瑜, 赵志勇, 张伟. 高强度聚焦超声消融术联合肝动脉化疗栓塞术治疗原发性肝细胞癌的效果及安全性分析[J/OL]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2025, 19(01): 56-59.
[4]	屈翔宇, 张懿刚, 李浩令, 邱天, 谈燚. USP24及其共表达肿瘤代谢基因在肝细胞癌中的诊断和预后预测作用[J/OL]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2024, 18(06): 659-662.
[5]	傅斌生, 冯啸, 杨卿, 曾凯宁, 姚嘉, 唐晖, 刘剑戎, 魏绪霞, 易慧敏, 易述红, 陈规划, 杨扬. 脂肪变性供肝在成人劈离式肝移植中的应用[J/OL]. 中华肝脏外科手术学电子杂志, 2024, 13(06): 789-794.
[6]	中华医学会器官移植学分会. 肝移植术后缺血性胆道病变诊断与治疗中国实践指南[J/OL]. 中华肝脏外科手术学电子杂志, 2024, 13(06): 739-748.
[7]	公宇, 廖媛, 尚梅. 肝细胞癌TACE术后复发影响因素及预测模型建立[J/OL]. 中华肝脏外科手术学电子杂志, 2024, 13(06): 818-824.
[8]	李一帆, 朱帝文, 任伟新, 鲍应军, 顾俊鹏, 张海潇, 曹耿飞, 阿斯哈尔·哈斯木, 纪卫政. 血GP73水平在原发性肝癌TACE疗效评价中的作用[J/OL]. 中华肝脏外科手术学电子杂志, 2024, 13(06): 825-830.
[9]	刘敏思, 李荣, 李媚. 基于GGT与Plt比值的模型在HBV相关肝细胞癌诊断中的作用[J/OL]. 中华肝脏外科手术学电子杂志, 2024, 13(06): 831-835.
[10]	魏志鸿, 刘建勇, 吴小雅, 杨芳, 吕立志, 江艺, 蔡秋程. 肝移植术后急性移植物抗宿主病的诊治（附四例报告）[J/OL]. 中华肝脏外科手术学电子杂志, 2024, 13(06): 846-851.
[11]	焦振东, 惠鹏, 金上博. 三维可视化结合ICG显像技术在腹腔镜肝切除术治疗复发性肝癌中的应用[J/OL]. 中华肝脏外科手术学电子杂志, 2024, 13(06): 859-864.
[12]	陈晓鹏, 王佳妮, 练庆海, 杨九妹. 肝细胞癌VOPP1表达及其与预后的关系[J/OL]. 中华肝脏外科手术学电子杂志, 2024, 13(06): 876-882.
[13]	袁雨涵, 杨盛力. 体液和组织蛋白质组学分析在肝癌早期分子诊断中的研究进展[J/OL]. 中华肝脏外科手术学电子杂志, 2024, 13(06): 883-888.
[14]	吴警, 吐尔洪江·吐逊, 温浩. 肝切除术前肝功能评估新进展[J/OL]. 中华肝脏外科手术学电子杂志, 2024, 13(06): 889-893.
[15]	王子阳, 王宏宾, 刘晓旌. 血清标志物对甲胎蛋白阴性肝细胞癌诊断的研究进展[J/OL]. 中华临床医师杂志(电子版), 2024, 18(07): 677-681.

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