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中华普通外科学文献(电子版) ›› 2015, Vol. 09 ›› Issue (02) : 94 -97. doi: 10.3877/cma.j.issn.1674-0793.2015.02.004

论著

外周血单个核细胞在Sonic hedgehog 信号通路中的活化表达
赵乾焜1, 梁森2, 闫慧明2,()   
  1. 1.030001 太原,山西医科大学
    2.030001 太原, 山西医科大学第二医院
  • 收稿日期:2014-06-18 出版日期:2015-04-01
  • 通信作者: 闫慧明
  • 基金资助:
    山西省卫生厅科技攻关项目(200920)

Activation of expression in peripheral blood mononuclear cells in Sonic hedgehog pathway

Qiankun Zhao1, Sen Liang2, Huiming Yan2,()   

  1. 1.Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, China
    2.the Second Hospital of Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, China
  • Received:2014-06-18 Published:2015-04-01
  • Corresponding author: Huiming Yan
引用本文:

赵乾焜, 梁森, 闫慧明. 外周血单个核细胞在Sonic hedgehog 信号通路中的活化表达[J/OL]. 中华普通外科学文献(电子版), 2015, 09(02): 94-97.

Qiankun Zhao, Sen Liang, Huiming Yan. Activation of expression in peripheral blood mononuclear cells in Sonic hedgehog pathway[J/OL]. Chinese Archives of General Surgery(Electronic Edition), 2015, 09(02): 94-97.

目的

探讨Sonic hedgehog 阻断抗体(Shh Ab)对外周血单个核细胞(PBMCs)抗胃癌MC 细胞作用的表达。

方法

Ficoll 密度梯度离心法分离正常人PBMCs,并与胃癌MC 细胞(GES-1细胞经亚硝酰胺类化合物处理) 建立共培养体系;RT-PCR 观察Shh、Gli-1 基因的表达并进行半定量数据分析;于共培养体系中加入Shh 阻断抗体,流式细胞术检测CD3、CD5、CD69 分子表达。

结果

RT-PCR 结果显示Gli-1mRNA 在MC+Shh Ab 细胞组值为0.284 5±0.002 5, 低于MC 细胞组的0.516 7±0.010 9(P<0.05);流式细胞检测Shh Ab 可促进CD3、CD69 分子表达,对CD5 分子没有显著影响;Shh Ab 增强PBMCs 对MC 细胞的杀伤。

结论

Shh Ab 可促进PBMCs 化,增强PBMCs 抗亚硝酰胺类化合物致癌机制的作用。

Objective

To discuss the expression of Sonic hedgehog blocking antibody (Shh Ab) in peripheral blood mononuclear cells(PBMCs) of anti-gastric cancer cells.

Methods

Healthy human PBMCs were centrifugated by Ficoll density gradient (GES-1 cells were treated by nitrite amides) and gastric cancer cells were co-cultured with MC. To observe the expression and semi-quantitative analysis of Shh and Gli-1 by RT-PCR, Shh blocking antibodies were added in the co-culture system, and the expression of CD3, CD5, CD69 was assayed by flow cytometry.

Results

RT-PCR showed that Gli-1mRNA in MC+Shh Ab cell group was 0.284 5±0.002 5, lower than the MC cell group 0.516 7 ± 0.010 9 (P<0.05). Flow cytometry showed Shh blocking antibodies promoted the expression of CD3 and CD69. Shh Ab enhanced cell killing PBMCs for MC.

Conclusion

Shh Ab can promote activation of PBMCs, and enhances anticarcinogenic effect of nitrite amides.

表1 PCR 特异性引物序列
图1 GES-1 细胞组、MC+Shh Ab 组和MC 细胞组Shh、Gli-1 mRNA RT-PCR 结果 注:“M”为标记物指示
表2 GES-1 细胞组、MC+Shh Ab 组和MC 细胞组Shh、Gli-1 mRNA 的表达()
图2 流式细胞检测活化的PBMCs 结果
图3 流式细胞检测活化的PBMCs 结果统计 注:* 代表PBMCs+GES-1(诱导第3 天)+Shh Ab 和PBMCs+GES-1+Shh Ab 组之间的差异有统计学意义;**PBMCs+MC+Shh Ab 和PBMCs+GES-1 (诱导第3 天)+Shh Ab 组之间的差异有统计学意义。 *α=0.05, P<0.05 时差异有统计学意义,**α=0.01, P<0.01 时差异有统计学意义
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