切换至 "中华医学电子期刊资源库"

中华普通外科学文献(电子版) ›› 2022, Vol. 16 ›› Issue (01) : 14 -19. doi: 10.3877/cma.j.issn.1674-0793.2022.01.003

论著

circRNA-CHD2通过miR-30e-3p/MDM2/TP53轴促进胰腺癌侵袭转移
高博文1, 罗宇明2, 孔瑶2, 张丁文2, 堐益垚2, 杨家彬2, 贺兴1, 李文滨1,()   
  1. 1. 510120 广州,中山大学孙逸仙纪念医院胆胰外科
    2. 510080 广州,广东省人民医院普外科
  • 收稿日期:2021-05-10 出版日期:2022-02-01
  • 通信作者: 李文滨
  • 基金资助:
    国家自然科学基金资助项目(81971463)

circRNA-CHD2 promoting metastasis of pancreatic cancer via miR-30e-3p/MDM2/TP53 axis

Bowen Gao1, Yuming Luo2, Yao Kong2, Dingwen Zhang2, Yiyao Ya2, Jiabin Yang2, Xing He1, Wenbin Li1,()   

  1. 1. Department of Biliary and Pancreatic Surgery, Sun Yat-sen Memorial Hospital, Sun Yat-sen University, Guangzhou 510120, China
    2. Department of General Surgery, Guangdong Provincial People’ s Hospital, Guangzhou 510080, China
  • Received:2021-05-10 Published:2022-02-01
  • Corresponding author: Wenbin Li
引用本文:

高博文, 罗宇明, 孔瑶, 张丁文, 堐益垚, 杨家彬, 贺兴, 李文滨. circRNA-CHD2通过miR-30e-3p/MDM2/TP53轴促进胰腺癌侵袭转移[J]. 中华普通外科学文献(电子版), 2022, 16(01): 14-19.

Bowen Gao, Yuming Luo, Yao Kong, Dingwen Zhang, Yiyao Ya, Jiabin Yang, Xing He, Wenbin Li. circRNA-CHD2 promoting metastasis of pancreatic cancer via miR-30e-3p/MDM2/TP53 axis[J]. Chinese Archives of General Surgery(Electronic Edition), 2022, 16(01): 14-19.

目的

探究circRNA-CHD2促进胰腺癌侵袭转移的机制。

方法

采用Kaplan-Meier曲线分析circRNA-CHD2的表达与胰腺癌患者临床病理特征及预后的相关性。通过划痕实验和Transwell实验分析circRNA-CHD2对胰腺癌细胞系侵袭转移功能的影响。采用生物信息学分析、RNA pull-down实验和qPCR实验证明circRNA-CHD2与miR-30e-3p的结合。

结果

与癌旁组织相比,circRNA-CHD2在胰腺癌组织中的表达显著升高(P<0.01)。circRNA-CHD2的高表达与胰腺癌患者的不良预后相关。体外功能实验表明,circRNA-CHD2的过表达可以促进胰腺癌的侵袭转移。进一步的机制实验提示,circRNA-CHD2能够竞争性结合miRNA-30e-3p,上调靶基因MDM2的表达,进一步抑制TP53的表达。

结论

circRNA-CHD2介导miR-30e-3p/MDM2/TP53轴调控胰腺癌的侵袭转移,其有望成为胰腺癌的生物学标志物和治疗靶点。

Objective

To reveal the mechanisms of circRNA-CHD2 promoting the metastasis of pancreatic cancer.

Methods

Kaplan-Meier curve was used to analyze the correlation between the expression of circRNA-CHD2 and the clinicopathological characteristics and prognosis of pancreatic cancer. The effect of circRNA-CHD2 on invasion and metastasis of pancreatic cancer cell line was analyzed by scratch test and Transwell test. Bioinformatics analysis, RNA pull-down assay and qPCR method were used to confirm the binding of circRNA-CHD2 and miR-30e-3p.

Results

There was a significantup-regulation of circRNA-CHD2 in pancreatic cancer tissues compared to tumor-adjacent tissues (P<0.01). Up-regulation of circRNA-CHD2 was correlated with poor prognosis of patients with pancreatic cancer. Functional tests showed that circRNA-CHD2 could promote pancreatic cancer cell metastasis in vitro. Mechanistically, circRNA-CHD2 functioned as a miR-30e-3p endogenous sponge and targetedmiR-30e-3p/MDM2/TP53 axis.

Conclusions

circRNA-CHD2 can promote metastasis of pancreatic cancer by regulating miR-30e-3p/MDM2/TP53 axis. Therefore, circRNA-CHD2 may serve as a prognostic biomarker and therapeutic target in pancreatic cancer.

表1 引物序列
图1 circRNA-CHD2的鉴定 A为筛选在胰腺癌组织中高表达的circRNA示意图;B为82例胰腺癌患者胰腺癌组织和癌旁组织中circRNA-CHD2的相对表达;C为通过circBase数据库得到circRNA-CHD2在CHD2基因上的定位以及结构示意图;D~E为在PANC-1和CAPAN-2两个胰腺癌细胞系的cDNA中,分别用随机引物和oligo-dT引物反转录后,qPCR实验检测circRNA-CHD2的表达情况;F~G为用RNA酶处理PANC-1和CAPAN-2两个细胞系的RNA,通过qPCR检测其中circRNA-CHD2和CHD2 mRNA的表达情况。3次独立实验的标准差以误差线的形式表示。*P<0.05,**P<0.01
表1 circRNA-CHD2表达与82例胰腺癌患者临床病理特征的关系(例)
图2 circRNA-CHD2在胰腺癌中高表达并与不良预后相关 A为不同TNM分期的胰腺癌患者中circRNA-CHD2的相对表达;B为circRNA-CHD2的表达与患者总生存时间的关系;C为circRNA-CHD2的表达与患者无病生存时间的关系;组间差异显著性采用Mann-Whitney U检验比较,*P<0.05,**P<0.01
图3 circRNA-CHD2在体外促进胰腺癌侵袭迁移 A为circRNA-CHD2在正常胰腺和胰腺癌细胞系中的相对表达;B为circRNA-CHD2的敲除效率;C为Transwell实验验证circRNA-CHD2敲低对12 h后相对侵袭和迁移能力的影响;D为circRNA-CHD2敲低对12 h后划痕愈合百分比的影响。不同组间差异使用方差分析联合Dunnett-t检验比较,3次独立实验的标准差在图中以误差线的形式表示。*P<0.05,**P<0.01
图4 circRNA-CHD2通过miR-30e-3p/MDM2/TP53轴调控胰腺癌侵袭转移 A为通过miRanda数据库预测能够与circRNA-CHD2集合的miRNA;B为通过RNAalifold预测circRNA-CHD2的二级结构;C为RNA pull-down实验验证与circRNA-CHD2结合的miRNA;D为筛选miR-30e-3p下游靶基因的模式图;E为通过qPCR验证miR-30e-3p对MDM2表达的影响;F为通过Western blotting验证miR-30e-3p对MDM2表达的影响;G为qPCR验证miR-30e-3p对TP53表达的影响;H为敲低circRNA-CHD2对miR-30e-3p/MDM2/TP53轴的影响。3次独立实验的标准差在图中以误差线的形式表示。*P<0.05,**P<0.01
[1]
Vincent A, Herman J, Schulick R, et al. Pancreatic cancer[J]. Lancet, 2011, 378(9791): 607-620.
[2]
中国抗癌协会胰腺癌专业委员会. 胰腺癌综合诊治指南(2018版)[J]. 临床肝胆病杂志, 2018, 34(10): 2109-2120.
[3]
Ren B, Cui M, Yang G, et al. Tumor microenvironment participates in metastasis of pancreatic cancer[J]. Mol Cancer, 2018, 17(1): 108.
[4]
Suhail Y, Cain MP, Vanaja K, et al. Systems biology of cancer metastasis[J]. Cell Syst, 2019, 9(2): 109-127.
[5]
Kristensen LS, Andersen MS, Stagsted LVW, et al. The biogenesis, biology and characterization of circular RNAs[J]. Nat Rev Genet, 2019, 20(11): 675-691.
[6]
Wang Y, Liu J, Ma J, et al. Exosomal circRNAs: biogenesis, effect and application in human diseases[J]. Mol Cancer, 2019, 18(1): 116.
[7]
Meng S, Zhou H, Feng Z, et al. CircRNA: functions and properties of a novel potential biomarker for cancer[J]. Mol Cancer, 2017, 16(1): 94.
[8]
李玉婷,孔瑶,罗宇明, 等. 环状RNA-PCAC1促进胰腺导管腺癌侵袭转移的研究[J/CD]. 中华普通外科学文献(电子版), 2020, 14(3): 174-179.
[9]
Chen LL. The expanding regulatory mechanisms and cellular functions of circular RNAs[J]. Nat Rev Mol Cell Biol, 2020, 21(8): 475-490.
[10]
Zhang HD, Jiang LH, Sun DW, et al. CircRNA: A novel type of biomarker for cancer[J]. Breast Cancer, 2018, 25(1): 1-7.
[11]
Weng W, Wei Q, Toden S, et al. Circular RNA ciRS-7-A promising prognostic biomarker and a potential therapeutic target in colorectal cancer[J]. Clin Cancer Res, 2017, 23(14): 3918-3928.
[12]
李四桥,常清潭,刘海潮, 等. 环状RNA circ-MFN2在胰腺癌中的表达及其临床意义[J]. 中国普外基础与临床杂志, 2021, 28(6): 762-767.
[13]
Kong Y, Li Y, Luo Y, et al. circNFIB1 inhibits lymphangiogenesis and lymphatic metastasis via the miR-486-5p/PIK3R1/VEGF-C axis in pancreatic cancer[J]. Mol Cancer, 2020, 19(1): 82.
[14]
Wade M, Li YC, Wahl GM. MDM2, MDMX and p53 in oncogenesis and cancer therapy[J]. Nat Rev Cancer, 2013, 13(2): 83-96.
[15]
Aubrey BJ, Strasser A, Kelly GL. Tumor-suppressor functions of the TP53 pathway[J]. Cold Spring Harb Perspect Med, 2016, 6(5): a026062.
[1] 赵之明, 尹注增, 刘荣. 胰腺癌转化治疗及机器人胰体尾癌根治性切除[J]. 中华普通外科学文献(电子版), 2023, 17(02): 160-160.
[2] 石思雅, 冯仕庭, 沈冰奇. 胰腺导管腺癌间质纤维化靶向治疗和无创评估的研究现状[J]. 中华普通外科学文献(电子版), 2022, 16(06): 443-447.
[3] 宁涓, 王晓燕, 魏华萍. 白蛋白结合型紫杉醇治疗转移性胰腺癌的疗效观察[J]. 中华普通外科学文献(电子版), 2022, 16(06): 407-411.
[4] 贾成朋, 王代宏, 陈华, 孙备. 可切除性胰腺癌预后术前预测模型的建立及应用[J]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2023, 17(05): 566-570.
[5] 韩显林. 完全腹腔镜根治性胰十二指肠切除术(联合肠系膜上静脉切除人工血管重建)[J]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2023, 17(02): 133-133.
[6] 李泽乾, 郝少龙, 张博, 纪凯伦, 韩威. 外周血非编码RNA在胰腺癌中研究进展[J]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2023, 17(02): 217-220.
[7] 张博, 韩威, 郝少龙, 李泽乾, 纪智礼. 竞争内源性RNA在胰腺癌研究中的进展[J]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2023, 17(02): 213-216.
[8] 郭伟林, 李运涛, 尚培中, 李晓武, 李伟. 胰腺癌S100A4和Midkine表达研究[J]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2023, 17(02): 149-152.
[9] 张原, 李小龙, 王亚鹏. 胰腺癌中ANGPTL2蛋白与免疫抑制细胞浸润的关系及临床意义[J]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2023, 17(02): 145-148.
[10] 李永宁, 付雪芹, 李英, 刘鹏, 刘松柏, 潘耀振. 基因相似序列家族成员126A靶向调控波形蛋白促进胰腺癌细胞侵袭和迁移及其机制[J]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2023, 17(02): 139-144.
[11] 毛永欢, 奚玲, 陆晨, 刘理想, 喻春钊, 沈晓菲. PI3K/Akt信号通路通过Plk1影响胰腺癌细胞PANC-1对吉西他滨的化疗敏感性[J]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2023, 17(02): 135-138.
[12] 韩显林, 林伯铮, 洪夏飞. 腹腔镜胰腺癌手术研究进展及血管解剖要点[J]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2023, 17(02): 129-132.
[13] 田锋, 郭俊超. 中国微创技术在胰腺癌手术中的应用现状和展望[J]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2023, 17(02): 124-128.
[14] 张太平, 翁桂湖, 刘悦泽. 不断推进中国腹腔镜胰腺癌手术规范化[J]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2023, 17(02): 120-123.
[15] 王迪, 吕少诚, 黄金灿, 潘飞, 姜涛, 郎韧. 肺腺癌胰腺转移伴门静脉侵犯一例[J]. 中华肝脏外科手术学电子杂志, 2023, 12(04): 457-460.
阅读次数
全文


摘要