Hedgehog信号通路转录因子Gli2在肝癌组织中的表达及意义

doi:10.3877/cma.j.issn.1647-0793.2013.01.004

目的

探讨Hedgehog（Hh）信号通路下游转录因子胶质瘤相关癌基因同源蛋白2（Gli2）在肝细胞癌组织中的表达及临床意义。

方法

采用Real time RT-PCR法及Western blot检测20对肝癌及癌旁组织Gli2基因mRNA及蛋白的表达；采用免疫组织化学法检测52对肝癌及癌旁组织Gli2蛋白的表达情况。

结果

Gli2 mRNA及蛋白在肝癌组织中的表达明显高于癌旁组织。52例肝癌组织中Gli2阳性表达38例（73.1%），相应的癌旁组织Gli2阳性表达8例（15.4%），差异有显著性（P<0.01）；且Gli2蛋白表达与肝癌分化程度、有无血管侵犯及淋巴结转移有相关性（P<0.05）。

结论

Gli2的异常表达与肝癌的发生发展及浸润转移密切相关，Gli2可能成为肝癌的重要生物学标志和生物治疗靶点。

关键词: 肝癌, Hedgehog信号通路, Gli2, 转录因子

Objective

To investigate the expression and clinical significance of downstream transcription factor glioma-associated oncogene homologue 2(Gli2) of Hedgehog(Hh) signaling pathway in human hepatocellular carcinoma(HCC).

Methods

Real time RT-PCR and Western blot were used for detection of mRNA and protein of Gli2 in 20 pairs of HCC tissues and corresponding paraneoplastic liver tissues; Immunohistochemistry was used for detection of Gli2 protein in 52 pairs of HCC tissues and paraneoplastic liver tissues.

Results

mRNA and protein expression of Gli2 in HCC were significantly higher than in paraneoplastic liver tissues. Immunohistochemical results showed that positive expression of Gli2 protein was 38/52(73.1%) in HCC tissues and 8/52(15.4%) in corresponding adjacent tissues, the difference was significant(P<0.01) and the expression of Gli2 protein was correlated with tumor differentiation, vascular invasion and lymph node metastasis(P<0.05).

Conclusion

The abnormal expression of Gli2 is closely related to tumorigenesis, invasion and metastasis of HCC, Gli2 may be an important biological marker of HCC and biological therapeutic target.

Key words: Hepatocellular carcinoma, Hedgehog signaling pathway, Gli2, Transcription factor

表1 Real time RT-PCR引物序列

目的基因	引物序列(5'-3')	产物长度（bp）
Gli2	上游序列TGGCCGCTTCAGATGACAGATGTTG	200
?	下游序列CGTTAGCCGAATGTCAGCCGTGAAG	?
18s rRNA	上游序列CCTGGATACCGCAGCTAGGA	112
?	下游序列GCGGCGCAATACGAATGCCCC	?

表1 Real time RT-PCR引物序列

目的基因	引物序列(5'-3')	产物长度（bp）
Gli2	上游序列TGGCCGCTTCAGATGACAGATGTTG	200
?	下游序列CGTTAGCCGAATGTCAGCCGTGAAG	?
18s rRNA	上游序列CCTGGATACCGCAGCTAGGA	112
?	下游序列GCGGCGCAATACGAATGCCCC	?

图1 Real time RT-PCR检测肝癌组织中Gli2 mRNA的相对表达水平

图2 Gli2蛋白的Western blot结果代表图

图3 Gli2蛋白在肝癌和癌旁组织中的表达（SP法，×400）

表2 Gli2蛋白表达与肝细胞癌临床病理特征之间的关系

临床病理特征		Gli2蛋白表达		χ ²值	P值
临床病理特征		阳性(n=38)	阴性(n=14)	χ ²值	P值
性别		?	?	0.044	0.834
?	男	26	10	?	?
?	女	12	4	?	?
年龄(岁)		?	?	0.061	0.805
?	≤60	23	9	?	?
?	>60	15	5	?	?
HBsAg		?	?	0.126	0.722
?	阳性	31	12	?	?
?	阴性	7	2	?	?
AFP(μg/L)		?	?	0.391	0.532
?	≤200	18	8	?	?
?	>200	20	6	?	?
肝硬化		?	?	0.316	0.574
?	Present	30	10	?	?
?	Absent	8	4	?	?
肿瘤大小(cm)		?	?	3.124	0.077
?	≤5	24	5	?	?
?	>5	14	9	?	?
TNM分期		?	?	0.931	0.335
?	I-II	22	6	?	?
?	Ⅲ-Ⅳ	16	8	?	?
分化程度		?	?	3.958	0.047^a
?	高	8	7	?	?
?	中、低	30	7	?	?
包膜		?	?	1.497	0.221
?	完整	12	7	?	?
?	不完整	26	7	?	?
血管侵犯		?	?	6.361	0.012 ^a
?	+	28	5	?	?
?	-	10	9	?	?
淋巴结转移		?	?	5.450	0.020^a
?	+	22	3	?	?
?	-	16	11	?	?

表2 Gli2蛋白表达与肝细胞癌临床病理特征之间的关系

临床病理特征		Gli2蛋白表达		χ ²值	P值
临床病理特征		阳性(n=38)	阴性(n=14)	χ ²值	P值
性别		?	?	0.044	0.834
?	男	26	10	?	?
?	女	12	4	?	?
年龄(岁)		?	?	0.061	0.805
?	≤60	23	9	?	?
?	>60	15	5	?	?
HBsAg		?	?	0.126	0.722
?	阳性	31	12	?	?
?	阴性	7	2	?	?
AFP(μg/L)		?	?	0.391	0.532
?	≤200	18	8	?	?
?	>200	20	6	?	?
肝硬化		?	?	0.316	0.574
?	Present	30	10	?	?
?	Absent	8	4	?	?
肿瘤大小(cm)		?	?	3.124	0.077
?	≤5	24	5	?	?
?	>5	14	9	?	?
TNM分期		?	?	0.931	0.335
?	I-II	22	6	?	?
?	Ⅲ-Ⅳ	16	8	?	?
分化程度		?	?	3.958	0.047^a
?	高	8	7	?	?
?	中、低	30	7	?	?
包膜		?	?	1.497	0.221
?	完整	12	7	?	?
?	不完整	26	7	?	?
血管侵犯		?	?	6.361	0.012 ^a
?	+	28	5	?	?
?	-	10	9	?	?
淋巴结转移		?	?	5.450	0.020^a
?	+	22	3	?	?
?	-	16	11	?	?

1	Parkin DM, Bray F, Ferlay J, et al. Global cancer statistics, 2002.CA Cancer J Clin, 2005, 55(2): 74-108.
2	Page JM, Harrison SA. NASH and HCC. Clin liver Dis, 2009, 13(4): 631-647.
3	Sicklick JK, Li YX, Jayaraman A, et al. Dysregulation of the Hedgehog pathway in human hepatocarcinogenesis. Carcinogenesis, 2006, 27(4):748-757.
4	Patil MA, Zhang J, Ho C, et al. Hedgehog signaling in human hepatocellular carcinoma. Cancer Biol Ther, 2006, 5(1):111-117.
5	Huang S, He J, Zhang X, et al. Activation of the hedgehog pathway in human hepatocellular carcinomas. Carcinogenesis, 2006, 27(7):1334-1340.
6	Livak KJ, Schmittgen TD. Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR and the 2(-Delta Delta C(T)) Method. Methods, 2001, 25(4): 402-408.
7	Dai DL, Martinka M, Li G. Prognostic significance of activated Akt expression in melanoma: a clinicopathologic study of 292 cases. J Clin Oncol, 2005, 23(7): 1473-1482.
8	Lum L, Beachy PA. The Hedgehog response network: sensors, switches, and routers. Science, 2004, 304(5678): 1755-1759.
9	Duman-Scheel M, Weng L, Xin S, et al. Hedgehog regulates cell growth and proliferation by inducing Cyclin D and Cyclin E. Nature, 2002, 417(6886): 299-304.
10	Mullor JL, Dahmane N, Sun T, et al. Wnt signals are targets and mediators of Gli function. Curr Biol, 2001, 11(10): 769-773.
11	Teh MT, Wong ST, Neill GW, et al. FOXM1 is a downstream target of Gli1 in basal cell carcinomas. Cancer Res, 2002, 62(16): 4773-4780.
12	Regl G, Kasper M, Schnidar H, et al. Activation of the BCL2 promoter in response to Hedgehog/GLI signal transduction is predominantly mediated by GLI2. Cancer Res, 2004, 64(21): 7724-7731.
13	Pola R, Ling LE, Silver M, et al. The morphogen Sonic hedgehog is an indirect angiogenic agent upregulating two families of angiogenic growth factors. Nat Med, 2001, 7(6): 706-711.
14	Katoh Y, Katoh M. Hedgehog signaling, epithelial-to-mesenchymal transition and miRNA (review). Int J Mol Med, 2008, 22(3): 271-275.
15	Ikram MS, Neill GW, Regl G, et al. GLI2 is expressed in normal human epidermis and BCC and induces GLI1 expression by binding to its promoter. J Invest Dermatol, 2004, 122(6): 1503-1509.
16	Cheng WT, Xu K, Tian DY, et al. Role of Hedgehog signaling pathway in proliferation and invasiveness of hepatocellular carcinoma cells. Int J Oncol, 2009, 34(3): 829-836.
17	Kim Y, Yoon JW, Xiao X, et al. Selective down-regulation of glioma-associated oncogene 2 inhibits the proliferation of hepatocellular carcinoma cells. Cancer Res, 2007, 67(8): 3583-3593.
18	Sahlgren C, Gustafsson MV, Jin S, et al. Notch signaling mediates hypoxia-induced tumor cell migration and invasion. Proc Nat Acad Sci U S A, 2008, 105(17): 6392-6397.
19	Ji J, Kump E, Wernli M, et al. Gene silencing of transcription factor Gli2 inhibits basal cell carcinomalike tumor growth in vivo. Int J Cancer, 2008, 122(1): 50-56.

[1]	唐梅, 周丽, 牛岑月, 周小童, 王倩. ICG荧光导航的腹腔镜肝切除术临床意义[J/OL]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2024, 18(06): 655-658.
[2]	高金红, 陈玉梅, 郭韵. 基于King互动达标理论的心理疏导在腹腔镜肝癌切除术患者的应用效果分析[J/OL]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2024, 18(05): 517-520.
[3]	林巧, 周丽. RFA联合LAH术治疗原发性肝癌并门静脉癌栓的临床效果分析[J/OL]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2024, 18(05): 521-524.
[4]	曾繁利, 齐秩凯, 杨贺庆. 两种经Glisson蒂鞘解剖路径肝切除术治疗原发性肝癌的肿瘤学疗效及风险比对[J/OL]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2024, 18(05): 525-527.
[5]	马立伟, 贾志强, 陈午盛, 邵明亮, 刘琼, 段玉松. CalliSpheres载药微球联合碘化油治疗肝癌的临床研究[J/OL]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2024, 18(04): 369-372.
[6]	胡宁宁, 赵延荣, 王栋, 王胜亮, 郭源. FMNL3与肝细胞癌肝移植受者预后的相关性研究[J/OL]. 中华移植杂志(电子版), 2024, 18(05): 283-288.
[7]	王飞, 陈政, 余德才, 曹亚娟. 原发性肝癌合并门静脉高压症的微创手术治疗[J/OL]. 中华腔镜外科杂志(电子版), 2024, 17(05): 306-310.
[8]	张敏, 朱建华, 缪雅芳, 郭锦荣. 菝葜皂苷元对肝癌HepG2细胞抑制作用的机制研究[J/OL]. 中华细胞与干细胞杂志(电子版), 2024, 14(06): 328-335.
[9]	曾聿理, 雷发容, 肖慧, 邱德亮, 谢静, 吴寻. 氯普鲁卡因通过调控circRNA-ZKSCAN1表达抑制肝癌Huh-7细胞体外生长和转移的研究[J/OL]. 中华细胞与干细胞杂志(电子版), 2024, 14(04): 220-228.
[10]	袁雨涵, 杨盛力. 体液和组织蛋白质组学分析在肝癌早期分子诊断中的研究进展[J/OL]. 中华肝脏外科手术学电子杂志, 2024, 13(06): 883-888.
[11]	吴警, 吐尔洪江·吐逊, 温浩. 肝切除术前肝功能评估新进展[J/OL]. 中华肝脏外科手术学电子杂志, 2024, 13(06): 889-893.
[12]	鲍乐, 刘颖, 王友彬, 陈龙, 朱玉芝, 梁爽, 权鹤太, 李鹏飞. 还阳通络灸在原发性肝癌介入治疗中的临床应用研究[J/OL]. 中华消化病与影像杂志(电子版), 2024, 14(03): 197-202.
[13]	广东省护士协会介入护士分会, 广东省医师协会介入医师分会. 原发性肝癌低血糖患者护理规范管理专家共识[J/OL]. 中华临床医师杂志(电子版), 2024, 18(08): 709-714.
[14]	韦巧玲, 黄妍, 赵昌, 宋庆峰, 陈祖毅, 黄莹, 蒙嫦, 黄靖. 肝癌微波消融术后中重度疼痛风险预测列线图模型构建及验证[J/OL]. 中华临床医师杂志(电子版), 2024, 18(08): 715-721.
[15]	蔡晓雯, 李慧景, 丘婕, 杨翼帆, 吴素贤, 林玉彤, 何秋娜. 肝癌患者肝动脉化疗栓塞术后疼痛风险预测模型的构建及验证[J/OL]. 中华临床医师杂志(电子版), 2024, 18(08): 722-728.

阅读次数

全文

摘要

选择文件类型/文献管理软件名称

选择包含的内容

Expression and significance of transcription factor Gli2 of Hedgehog signaling pathway in human hepatocellular carcinoma

模态框（Modal）标题

选择文件类型/文献管理软件名称

选择包含的内容

Expression and significance of transcription factor Gli2 of Hedgehog signaling pathway in human hepatocellular carcinoma