切换至 "中华医学电子期刊资源库"
高级检索
中华普通外科学文献(电子版)

中华普通外科学文献(电子版) ›› 2018, Vol. 12 ›› Issue (02) : 90 -95. doi: 10.3877/cma.j.issn.1674-0793.2018.02.005

所属专题： 文献；

论著

人胃癌原位移植转移动物模型的构建
赵广银1, 苏乔1,†(), 李雯雯1, 李武国1   
  1. 1. 510080　广州，中山大学附属第一医院动物实验中心
  • 收稿日期:2017-10-07 出版日期:2018-04-01
  • 通信作者: 苏乔
  • 基金资助:
    广东省科技计划项目(2014A030304016)

Establishment of an orthotopic transplantation tumor model of human gastric cancer complicated by metastasis

Guangyin Zhao1, Qiao Su1,†(), Wenwen Li1, Wuguo Li1   

  1. 1. Animal Laboratory Center, the First AffiliatedHospital, Sun Yat-sen University, Guangzhou 510080, China
  • Received:2017-10-07 Published:2018-04-01
  • Corresponding author: Qiao Su
  • About author:
    Corresponding author: Su Qiao, Email:
全文 ( ) 下载PDF ( ) 导出引用
引用本文：

赵广银, 苏乔, 李雯雯, 李武国. 人胃癌原位移植转移动物模型的构建[J/OL]. 中华普通外科学文献(电子版), 2018, 12(02): 90-95.

Guangyin Zhao, Qiao Su, Wenwen Li, Wuguo Li. Establishment of an orthotopic transplantation tumor model of human gastric cancer complicated by metastasis[J/OL]. Chinese Archives of General Surgery(Electronic Edition), 2018, 12(02): 90-95.

目的

构建人胃癌原位移植转移动物模型，并利用活体成像系统对肿瘤转移进行可视化的实时监测评价。

方法

构建带有绿色荧光蛋白序列和萤火虫荧光素酶序列的慢病毒重组表达质粒；慢病毒包装感染人BGC-823胃癌细胞株，筛选得到BGC-823-eGFP-luc2稳转株；细胞接种高度免疫缺陷小鼠腋下，建立人胃癌皮下种植动物模型，继而建立人胃癌肿瘤皮下传代动物模型；将皮下传代模型肿瘤组织原位移植高度免疫缺陷小鼠胃部，构建人胃癌原位移植转移动物模型；利用活体成像系统对以上模型进行监测评价。

结果

获得稳定表达绿色荧光蛋白和萤火虫荧光素酶的BGC-823-eGFP-luc2细胞株；成功构建皮下种植和传代动物模型；成功构建人胃癌原位移植转移动物模型。

结论

慢病毒感染方法适用于人胃癌BGC-823-eGFP- luc2稳转株的建立；利用BGC-823-eGFP-luc2细胞株可以快速构建人胃癌皮下种植动物模型和原位移植转移动物模型，利用活体成像系统可以直观、非侵入的有效监测胃癌远端转移灶的发生、发展情况。

关键词: 胃肿瘤, 动物模型, 原位移植, 活体成像系统
Objective

To establish animal models of orthotopic transplantation of human gastric carcinoma and provide the visible research method to monitor tumor micrometastases with in-vivo imaging system.

Methods

The lentiviral expression vectors carrying luc2, eGFP and puromycin genes was constructed. BGC-823 -eGFP-luc2 stable strain was screened after BGC-823 cell line was infected by the lentivirus. Then animal models with subcutanious implatation and orthotopic transplantation were established.

Results

BGC-823-eGFP-luc2 cell stably expressing green fluorescent protein and firefly luciferase was obtained. The animal models of subcutaneous implantation and orthotopic transplantation were successfully established.

Conclusions

The method of lentiviral infection is suitable for the establishment of human gastric cancer BGC-823-eGFP-luc2 cell strain, which can be used to establish human gastric cancer subcutaneously and orthotopic transplantation models complicated by metastasis rapidly. The in vivo imaging system can be used to monitor the occurrence and development of distal metastasis of gastric cancer.

Key words: Stomach neoplasms, Animal models, Orthotopic transplantation, In-vivo imaging system
图1 CD513B-1-luc2重组表达质粒的构建　A为Trans 2K Plus Ⅱ DNA marker标准条带；B为pGL4.20质粒luc2基因PCR扩增产物；C为CD513-B质粒与luc2扩增产物酶切鉴定；D为重组质粒与pGL4 20载体luc2片段BLAST比对结果
图2 应用于活体成像的BGC-823-eGFP-luc2细胞系构建及流式分选　A为293T细胞慢病毒感染48 h荧光表达情况（×40）；B为BGC-823细胞慢病毒感染48 h荧光表达情况（×40）；C为流式分选BGC-823-eGFP-luc2双标细胞比例
图3 梯度稀释法检测BGC-823-eGFP-luc2细胞荧光素酶活性
图4 活体成像系统监测人胃癌皮下种植和皮下传代模型体内生物发光情况　A为荧光素酶在人胃癌皮下种植动物模型中表达监测（n=3）；B为荧光素酶在人胃癌皮下种植传代动物模型中表达监测（n=3）
图5 活体成像系统监测人胃癌原位移植转移模型体内原发灶和转移灶生物发光情况　A为人胃癌原位移植转移模型体内原发灶和转移灶生物发光监测（n=8）；B为基于整体生物发光强度绘制模型肿瘤生长曲线
图6 人胃癌原位移植转移模型胃体、肝脏、肺脏解剖及病理切片分析（HE染色　×40、×200） A为各模型鼠胃体、肝脏、肺脏整体解剖情况（红色箭头所指处为肝脏明显肿瘤结节）；B为胃部肿瘤原发灶病理切片结果；C为肝脏肿瘤转移灶病理切片结果；D为肺脏肿瘤转移灶病理切片结果
[1]
Ferlay J, Soerjomataram I, Dikshit R, et al. Cancer incidence and mortality worldwide: Sources, methods and major patterns in GLOBOCAN 2012[J]. Int J Cancer, 2015, 136(5): E359-E386.
[2]
Rygaard J, Povlsen CO. Heterotransplantation of a human malignant tumour to "Nude" mice[J]. Apmis, 1969, 77(4): 758.
[3]
Fujihara T, Sawada T, Hirakawa K, et al. Establishment of lymph node metastatic model for human gastric cancer in nude mice and analysis of factors associated with metastases[J]. Clin Exp Metastasis, 1998, 16(4): 389-398.
[4]
Kaneko K, Yano M, Yamano T, et al. Detection of peritoneal micrometases of gastric carcinoma with green fluorescent protein and carcinoembryonic antigen promoter[J]. Cancer Res, 2001, 61(14): 5570-5574.
[5]
闫明霞，姚明，刘乾, 等. 裸小鼠人胃癌肝转移模型的筛选和建立[J]. 实验动物与比较医学, 2005, 25(2): 72-76.
[6]
Li Y, Li B, Zhang Y, et al. Serial observations on an orthotopic gastric cancer model constructed using improved implantation technique[J]. World J Gastroenterol, 2011, 17(11): 1442-1447.
[7]
闫明霞，朱淼鑫，刘蕾, 等. 实验性肿瘤细胞转移动物模型的活体成像观察[J]. 实验动物与比较医学, 2012, 32(5): 376-382.
[8]
朱淼鑫，姚明. 小动物活体成像技术的应用[J]. 中国比较医学杂志, 2011, 21(3): 1-5.
[1] 安杰, 牛云峰, 刘伟. LINC00520 通过miR-519b-3p/HIF1A 轴促进胃癌的侵袭转移[J/OL]. 中华普通外科学文献(电子版), 2024, 18(06): 430-436.
[2] 李国新, 陈新华. 全腹腔镜下全胃切除术食管空肠吻合的临床研究进展[J/OL]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2025, 19(01): 1-4.
[3] 陈方鹏, 杨大伟, 金从稳. 腹腔镜近端胃癌切除术联合改良食管胃吻合术重建His角对术后反流性食管炎的效果研究[J/OL]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2025, 19(01): 15-18.
[4] 许杰, 李亚俊, 韩军伟. 两种入路下腹腔镜根治性全胃切除术治疗超重胃癌的效果比较[J/OL]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2025, 19(01): 19-22.
[5] 李刘庆, 陈小翔, 吕成余. 全腹腔镜与腹腔镜辅助远端胃癌根治术治疗进展期胃癌的近中期随访比较[J/OL]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2025, 19(01): 23-26.
[6] 刘世君, 马杰, 师鲁静. 胃癌完整系膜切除术+标准D2根治术治疗进展期胃癌的近中期随访研究[J/OL]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2025, 19(01): 27-30.
[7] 任佳, 马胜辉, 王馨, 石秀霞, 蔡淑云. 腹腔镜全胃切除、间置空肠代胃术的临床观察[J/OL]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2025, 19(01): 31-34.
[8] 王露, 周丽君. 全腹腔镜下远端胃大部切除不同吻合方式对胃癌患者胃功能恢复、并发症发生率的影响[J/OL]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2025, 19(01): 92-95.
[9] 陈浩, 王萌. 胃印戒细胞癌的临床病理特征及治疗选择的研究进展[J/OL]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2025, 19(01): 108-111.
[10] 梁孟杰, 朱欢欢, 王行舟, 江航, 艾世超, 孙锋, 宋鹏, 王萌, 刘颂, 夏雪峰, 杜峻峰, 傅双, 陆晓峰, 沈晓菲, 管文贤. 联合免疫治疗的胃癌转化治疗患者预后及术后并发症分析[J/OL]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2024, 18(06): 619-623.
[11] 刘海旺, 施海, 尚利峰. 不同吻合器在腹腔镜远端胃癌根治术Roux-en-Y式吻合中的应用对比[J/OL]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2024, 18(06): 643-646.
[12] 许杰, 李亚俊, 冯义文. SOX新辅助化疗后腹腔镜胃癌D2根治术与常规根治术治疗进展期胃癌的近期随访比较[J/OL]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2024, 18(06): 647-650.
[13] 贺斌, 马晋峰. 胃癌脾门淋巴结转移危险因素[J/OL]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2024, 18(06): 694-699.
[14] 黄福, 王黔, 金相任, 唐云川. VEGFR2、miR-27a-5p在胃癌组织中的表达与临床病理参数及预后的关系研究[J/OL]. 中华普外科手术学杂志(电子版), 2024, 18(05): 558-561.
[15] 张立俊, 孙存杰, 胡春峰, 孟冲, 张辉. MSCT、DCE-MRI 评估术前胃癌TNM 分期的准确性研究[J/OL]. 中华消化病与影像杂志(电子版), 2024, 14(06): 519-523.
阅读次数
全文


摘要

版权所有 中华医学会 中华医学电子音像出版社有限责任公司  京ICP备14006079号-1  网络出版服务许可证：(署)网出证(京)字第075号